化肥對(duì)植物生長(zhǎng)具有重要作用，但長(zhǎng)期施用助劑會(huì)造成水體富營(yíng)養(yǎng)化，土壤板結(jié)，產(chǎn)品品質(zhì)下降[1]。微 生物肥料是由一種或數(shù)種有益活體微生物，特別是 植物根際促生菌（Plant Growth Promoting Rhi- zobacteria，PGPR )組合而成的，借助有益微生物代 謝過(guò)程或代謝產(chǎn)物，達(dá)到促進(jìn)植株生長(zhǎng)的目的[2?3]。

 

微生物肥料生產(chǎn)成本低，能顯著提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和 減少化肥使用量，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著越來(lái)越重要 的作用。保證微生物肥料中微生物的有效性是制備 微生物肥料的關(guān)鍵[4?6]。

 

假單胞菌（)是一種常用的PG- PR，可分解葡萄糖、產(chǎn)接觸酶、產(chǎn)氧化酶、還原硝酸 鹽，可通過(guò)聯(lián)合固氮、溶磷、產(chǎn)生鐵載體、產(chǎn)植物激素 等多種機(jī)制促進(jìn)植物生長(zhǎng)[7-8]。生物肥料在貯存過(guò) 程中，其有效活菌數(shù)會(huì)逐漸下降，嚴(yán)重影響產(chǎn)品質(zhì)量 及施用效果，如何提高生物肥料在貯存過(guò)程中的活 菌數(shù)是提高其施用效果的重要一環(huán)。本研究選用的 假單胞菌似）YT3篩選于櫻桃根際土 壤，可產(chǎn)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素，對(duì)于促進(jìn)植物根系生 長(zhǎng)、活化土壤養(yǎng)分具有積極作用，具備開(kāi)發(fā)微生物肥 料的潛力[9?11]。以YT3為主要組成的復(fù)合菌劑 (YT3:乳酸菌：酵母菌=2 : 1 : 1)已證明具有良好 的促生效果[12]。本研究選擇多種助劑（碳酸鈣、黃 原膠、親水性白碳黑、氯化鈉和羧甲基纖維素鈉），研 究了其在復(fù)合菌劑貯存90 d后對(duì)活菌數(shù)的影響，以 期為生物肥料的貯存提供科學(xué)依據(jù)。

 

1材料與方法 1.1試驗(yàn)材料復(fù)合菌劑（YT3:乳酸菌：酵母菌=2 : 1 : 1); 碳酸鈣、黃原膠、親水性白碳黑、氯化鈉、羧甲基纖維 素鈉。

 

1.2試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)1.2.1碳酸鈣加人量試驗(yàn)固定加入黃原膠3. 5%，親水性白碳黑6沁，氯 化鈉羧甲基纖維素鈉4. 5%。改變碳酸鈣加人 量，分別為 1%。、2%。、3%。、4%〇、5%j和 6%〇。

 

1.2.2黃原膠加人量試驗(yàn)固定加人碳酸鈣3%，親水性白碳黑6%，氯化 鈉6%，羧甲基纖維素鈉4. 5%^改變黃原膠的加人 量，分別為 1%。、2%〇，3%，4%。、5%。和 6%〇。

 

1.2.3親水性白碳黑加入量試驗(yàn)固定加人碳酸鈣3%，黃原膠3. 5%，氯化鈉 6%，羧甲基纖維素鈉4. 5%。改變親水性白碳黑的 加人量，分別為 3%。、4%〇，5%〇，6%。、7%。和8%〇。 1.2.4氯化鈉加人量試驗(yàn)固定加人碳酸鈣3%，黃原膠3. 5%，親水性白 碳黑6%，羧甲基纖維素鈉4. 5%。改變氯化鈉的加 人量，分別為 3%。、4%〇，5%，6%。、7%。和 8%〇。

 

1.2.5羧甲基纖維素鈉加人量試驗(yàn)固定加人碳酸鈣3%，黃原膠3. 5%，親水性白 碳黑6%，氯化鈉6%。改變羧甲基纖維素鈉的加人0505050505A5-4-4-3-3-2-2*LL°-C6%〇

 

5%〇

 

.F1 .

 

be7%〇

 

量，分別為 2%Q、3%，4%，5%。、6%。和7%〇。

 

1.3試驗(yàn)方法酵母菌、乳酸菌和假單胞菌YT3于豆芽培養(yǎng)基 上活化。酵母菌和YT3挑菌至200ml豆芽培養(yǎng)基， 37°C180rpm下?lián)u菌48h。乳酸菌371下靜置培養(yǎng) 72h。用滅菌豆芽培養(yǎng)基調(diào)YT3:乳酸菌：酵母菌= 2 : 1 : 1。無(wú)菌條件下分裝滅菌的三角瓶，同時(shí)加入 相應(yīng)的穩(wěn)助劑，用滅菌豆芽培養(yǎng)基調(diào)節(jié)菌液中有效 活菌數(shù)為2.7\1080?11/1111，制成。保存90〇1后稀 釋涂布豆芽汁固體培養(yǎng)基，測(cè)定菌液中的有效活菌 數(shù)。

 

1.4統(tǒng)計(jì)分析采用Excel 2007處理數(shù)據(jù)并制圖，采用SAS 8. 〇統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行方差分析，LSD法對(duì)不同處 理的有效活菌數(shù)進(jìn)行多重比較。

 

2結(jié)果與分析2.1碳酸鈣對(duì)活菌數(shù)的影響混合菌液中加人不同濃度的碳酸鈣對(duì)菌液中的 有效活菌數(shù)產(chǎn)生顯著影響（圖1)。不同碳酸鈣處理 中活菌數(shù)的變異系數(shù)為35. 97%，在外界條件一致 的條件下，當(dāng)碳酸鈣濃度加入量為3%0時(shí)，有效活菌 數(shù)的含量最高，達(dá)3. OX 108 CFU/ml,分別比其他試 驗(yàn)處理增加了 102. 70%、108. 33%、150. 01%、 66. 67%和74. 42%。當(dāng)碳酸鈣加人量為4%。時(shí)，菌 液中的有效活菌數(shù)最低，差異顯著。

 

圖1碳酸鈣濃度對(duì)苗液中活菌數(shù)的影響2.2黃原膠對(duì)活茴數(shù)的影響黃原膠濃度對(duì)混合菌液中活菌數(shù)影響如圖2所 示?？梢钥闯?，不用黃原膠添加量對(duì)活菌數(shù)產(chǎn)生顯 著影響，不同黃原膠處理中活菌數(shù)的變異系數(shù)為 45. 39%，當(dāng)黃原膠的濃度加人量為4%。時(shí)，有效活 菌數(shù)的含量最高達(dá)4. 4X108 CFU/ml，分別比其他 試驗(yàn)處理高出 223. 53%、180. 25%、126. 80%、 7. U%和35. 80%，比初始菌液濃度高出62. 96%。 其次為黃原膠加入量5%。和6%。的試驗(yàn)處理，同另外 3個(gè)處理之間差異顯著。

 

1%〇296〇3%〇4%〇

 

黃原股濃度圖2黃原膠濃度對(duì)苗液中活苗數(shù)的彩響2.3親水性白碳黑對(duì)活菌數(shù)的影響圖3可以看出，親水性白炭黑的不同加入量同 樣對(duì)菌液中的有效活菌數(shù)產(chǎn)生顯著影響。不同黃原 膠處理中活菌數(shù)的變異系數(shù)為82. 56%，這說(shuō)明親 水性白炭黑的加入量對(duì)菌液中的有效活菌數(shù)影響非 常大。在外界條件一致的條件下，當(dāng)親水性白碳黑 濃度加人量為5%。時(shí)，菌液中的有效活菌數(shù)的含量 最高達(dá)4.0X108 CFU/ml，同其他5個(gè)親水性白碳 黑加人量處理之間差異顯著，分別增加了 809.09%、 166. 67%、809. 09%、194. 12%和 127. 27%。加入 3沁和6沁親水性白碳黑處理的有效活菌數(shù)顯著最 低。

 

4.54.03.女U3.02.52.0槭1.51.00.50.0C[~13%〇4%〇5%〇6%〇

 

親水性白炎黑濃度圖3親水性白炭黑濃度對(duì)菌液中活菌數(shù)的影響 2.4氣化鈉對(duì)活菌數(shù)的彩響氯化鈉對(duì)菌液中的有效活菌數(shù)影響差異達(dá)顯著 水平（圖4)。不同氯化鈉處理中活菌數(shù)的變異系數(shù) 為55. 96%，在外界條件一致的條件下，當(dāng)氯化鈉濃 度調(diào)整為為8沁時(shí)，菌液中的有效活菌數(shù)的含量最 高為2. 32X108 CFU/ml，分別比其他5個(gè)氯化鈉加 人量處理高出了 544. 44%、262. 50%、13. 73%、 56. 76%和71. 85%。雖然加人8%0時(shí)活菌數(shù)有一定 程度提高，但是同加人5%。時(shí)差異不顯著，因此，從 經(jīng)濟(jì)角度考慮，氯化鈉加人5%。為宜。

 

-0-5-0-5 2-L L0-(i&solx)^48^4%〇

 

3%〇

 

8%〇

 

7%>0.05%〇6%〇

 

氣化鈉濃度圖4氯化鈉濃度對(duì)菌液中活菌數(shù)的影響2.S羧甲基纖維素鈉對(duì)活茴數(shù)的影響混合菌液中加人不同濃度的羧甲基纖維素鈉對(duì) 菌液中的有效活菌數(shù)產(chǎn)生顯著影響。不同羧甲基纖 維素鈉處理中活菌數(shù)的變異系數(shù)為36. 22%，在外 界條件一致的條件下，當(dāng)竣甲基纖維素鈉濃度加人 量為5%。時(shí)，有效活菌數(shù)的含量最高達(dá)3. 72X108 CFU/ml，分別比其他試驗(yàn)處理增加64. 60%、 30. 99%、55. 09%、210. 12%和 102. 17%。羧甲基 纖維素鈉加入量為6%?)的試驗(yàn)處理有效活菌數(shù)顯著 最低。

 

0.02%〇3%〇4%〇5%〇6%〇796〇

 

羥曱基纖維素鈉濃度圖S 羧甲基纖維素鈉濃度對(duì)苗液中活菌數(shù)的彩響3結(jié)論混合菌液中(假單胞菌：乳酸菌：酵母菌=2 : 1 :1)添加不同濃度的助劑（碳酸鈣、黃原膠、親水性 白碳黑、氯化鈉和羧甲基纖維素鈉)均可對(duì)有效活菌 數(shù)產(chǎn)生顯著影響。不同助劑對(duì)活菌數(shù)影響順序?yàn)橛H 水性白碳黑 > 氯化鈉 > 黃原膠 > 竣甲基纖維素 鈉 > 碳酸鈣。碳酸鈣和黃原膠的單因子試驗(yàn)結(jié)果 認(rèn)為，兩助劑的適宜添加比例分別為3%。和4%^而 親水性白碳黑、氯化鈉和羧甲基纖維素鈉的適宜添 加比例均為5%。將初始菌液有效活菌數(shù)濃度調(diào)整 為2. 7X108 CFU/ml,菌液在保存至第90 d時(shí)的有 效活菌數(shù)濃度均高于2.0 X108CFU/ml，符合微生物肥料行業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[13]。